濾色系統是熒光顯微鏡的重要部位,由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號,各廠(chǎng)家名稱(chēng)常不統一。濾板一般都以基本色調命名,前面字母代表色調,后面字母代表玻璃,數字代表型號特點(diǎn)。
如德國產(chǎn)品(Schott)BG12,就是種藍色玻璃,B是藍色的第一個(gè)字母,G是玻璃的第一個(gè)字母;我國產(chǎn)品的名稱(chēng)已統一用拼音字母表示,如相當于BG12的藍色濾板名為QB24,Q是青色(藍色)拼音的第一個(gè)字母,B是玻璃拼音的第一個(gè)字母。
不過(guò)有的濾板也可以透光分界濾長(cháng)命名,如K530,就是表示壓制濾長(cháng)530nm以下的光而透過(guò)530nm以上的光。還有的廠(chǎng)家的濾板以數字命名,如美國Corning廠(chǎng)的NO:5-58,即相當于BG12。
1.激發(fā)濾板 根據光源和熒光色素的特點(diǎn),可選用以下三類(lèi)激發(fā)濾板,提供一定波長(cháng)范圍的激發(fā)光。
紫外光激發(fā)濾板:此濾板可使400nm以下的紫外光透過(guò),阻擋400nm以上的可見(jiàn)光通過(guò)。常用型號為UG-1或UG-5,外加一塊BG-38,以除去紅色尾波。
紫外藍光激發(fā)濾板:此濾板可使300~450nm范圍內的光通過(guò)。常用型號為ZB-2或ZB-3,外加BG-38。
紫藍光激發(fā)濾板:它可使350~490nm的光通過(guò)。常用型號為QB24(BG12)。
最大吸收峰在500nm以上者的熒光素(如羅達明色素)可用藍綠濾板(如B-7)激發(fā)。
開(kāi)始采用金屬膜干涉濾板,由于針對性強,波長(cháng)適當,因而激發(fā)效果比較玻璃濾更好。如西德Leitz廠(chǎng)的FITC專(zhuān)用KP490濾板和羅達明的S546綠色濾板,均遠比玻璃濾板效果好。
激發(fā)濾板分薄厚兩種,一般暗視野選用薄濾板,亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些?;疽笫且垣@得最明亮的熒光和好的背景為準。
2.壓制濾板 壓制濾板的作用是阻擋激發(fā)光通過(guò),提供相應波長(cháng)范圍的熒光。與激發(fā)濾板相對應,常用以下3種壓制濾板:
紫外光壓制濾板:可通過(guò)可見(jiàn)光、阻擋紫外光通過(guò)。能與UG-1或UG-5組合。常用GG-3K430或GG-6K460。
紫藍光壓制濾板:能通過(guò)510nm以上波長(cháng)的光(綠到紅),能與BG-12組合。通常用OG-4K510或OG-1K530。
紫外紫光壓制濾板:能通過(guò)460nm以上波長(cháng)的光(藍到紅),可與BG-3組合,常用OG-11K470AK 490,K510。