一、顯微鏡的操作使用
利用自然光源鏡檢時(shí),用朝北的光源,不宜采用直射陽(yáng)光;利用人工光源時(shí),宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對實(shí)習臺,采取端正的姿態(tài),兩眼自然張開(kāi),左眼觀(guān)察標本,右眼觀(guān)察記錄及繪圖,同時(shí)左手調節焦距,使物象清晰并移動(dòng)標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時(shí),液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結果。
鏡檢時(shí)應將標本按一定方向移動(dòng)視野,直至整個(gè)標本觀(guān)察完畢,以便不漏檢,不重復。
顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線(xiàn)的調節。觀(guān)察寄生蟲(chóng)標本時(shí),光線(xiàn)調節甚為重要。因為所觀(guān)察的標本如蟲(chóng)卵、包囊等,均為自然光狀態(tài)的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無(wú)色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著(zhù)鏡檢時(shí)對不同標本和要求,需要隨時(shí)調節焦距和光線(xiàn),這樣才能使觀(guān)察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線(xiàn)宜強,無(wú)色或未染色標本光線(xiàn)宜弱;低倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜弱,高倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜強。
1. 對光:
(1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線(xiàn)。
(2)撥動(dòng)反光鏡,調節至視野亮無(wú)陰影。反光鏡有平、凹兩面,光源強時(shí)用平面,較暗時(shí)用凹面,需要強光時(shí),將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時(shí),將聚光器降低,或光圈適當縮小。
(3)將待觀(guān)察的標本置載物臺上,轉動(dòng)粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉動(dòng)粗調節器的同時(shí),須俯身在鏡旁仔細觀(guān)察接物鏡與標本之間的距離。
(4)左眼于接目鏡觀(guān)察,同時(shí)左手轉動(dòng)粗調節,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物象看到上時(shí)即停,再調微調節器,至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線(xiàn)的調節:
顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉換盤(pán)孔中。觀(guān)察標本時(shí),先使用低倍接物鏡,此時(shí),視野較大,標本較易查出,但放大倍數較?。ㄒ话惴糯?00倍),較小的物體不易觀(guān)察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍),能觀(guān)察微小的物體或結構。
寄生蟲(chóng)的蠕蟲(chóng)卵,微絲蚴,原蟲(chóng)的滋養體及包囊,昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng),均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲(chóng),則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀(guān)察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見(jiàn)的物體或其內部構造時(shí),則轉高倍鏡觀(guān)察。使用油鏡觀(guān)察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀(guān)察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:
(1)標明放大倍數10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。
(2)低倍鏡短,高倍鏡較長(cháng),油鏡長(cháng)。
(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡大,高倍鏡較大,油鏡小。
(4)油鏡頭上??逃泻谏h(huán)圈,或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:
(1)光線(xiàn)對好后,移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀(guān)察的標本。
(2)如標本的體積較大,不能清楚查見(jiàn)其構造因而不能確認時(shí),則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。
(3)旋轉微調節器至物象清晰為止。
(4)調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法:
(1)原理:使用油鏡觀(guān)察時(shí),需加香柏油,因為油鏡需要進(jìn)入鏡頭的光線(xiàn)多,但油鏡的透氣孔小,這樣進(jìn)入的光線(xiàn)就少,物體不易看清楚。同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線(xiàn),由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光,因此射入鏡頭的光線(xiàn)就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線(xiàn)不通過(guò)空氣,這樣射入鏡頭的光線(xiàn)就較多,物象就看得清楚。
(2)油鏡的使用:
a.將光線(xiàn)調至程度(聚光器提高,光圈全部開(kāi)放)。
b.轉動(dòng)粗調節器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過(guò)多,不要涂開(kāi))于接物鏡正下方標本上。
c.轉動(dòng)接物鏡轉換盤(pán),使油鏡頭于鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀(guān)察下,轉動(dòng)粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉動(dòng)粗調節器,使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標本的物象為止。
f.轉動(dòng)微調節器,使視野物象達到清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器,并轉動(dòng)微調節器以觀(guān)察標本。
h.標本觀(guān)察完畢后,轉動(dòng)粗調節器將鏡筒升起,取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。
6. 注意事項:
(1)使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱(chēng)及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)習中所觀(guān)察的標本,大多數為無(wú)色和顏色較淺,因此必須注意光線(xiàn)的調節。
(3)新鮮標本觀(guān)察時(shí),須加蓋玻片,以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時(shí)可使標本表面勻平,光線(xiàn)得以集中,有利于觀(guān)察。
二、 顯微鏡的保養
圖3 加用蓋玻片后,標本表面勻平,光線(xiàn)得以集中,便于檢查示意圖
1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時(shí),右手緊握鏡臂,左手穩托鏡座,輕輕取出。不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實(shí)習臺上或裝 入木箱內。
2.顯微鏡放到實(shí)習臺上時(shí),先放鏡座的一端,再將鏡座全部放穩,切不可使鏡座全面同時(shí)與臺面接觸,這樣震動(dòng)過(guò)大,透鏡和微調節器的裝置易損壞。
3.顯微鏡須經(jīng)常保持清潔,勿使油污和灰塵附著(zhù)。如透鏡部分不潔時(shí),用擦鏡紙輕擦,如有油污,先將擦鏡紙蘸少許二甲苯拭去。
4.顯微鏡不能在陽(yáng)光下暴曬和使用。
5.接目鏡和接物鏡不要隨便抽出和卸下必須抽取接目鏡時(shí),須將鏡筒上口凈用布遮蓋,避免灰塵落入鏡筒內。更換接物鏡時(shí),卸下后應倒置在清潔的臺面下,并隨即裝入木箱的置放接物鏡的管內。
6.顯微鏡用完后,取下標本片,經(jīng)聚光器降下,再將物鏡轉成“八”字形,轉動(dòng)粗調節器使鏡筒下降,以免接物鏡與聚光器相碰。
7.顯微鏡應放在干燥的地方,以防生霉。